SOX2对卵巢癌转移、耐药的影响及卵巢癌靶标多肽筛选

【摘要】卵巢癌是女性生殖器官常见的肿瘤之一,其发病率仅次于子宫内膜癌而列居第二位,但其死亡率和5年存活率均占各类妇科肿瘤的首位。当前卵巢癌常规的治疗方式就是手术切除结合术后的化疗,其中化疗药物包括卡铂和紫三醇等。然而由于卵巢癌的转移和化疗耐药性的产生,使得很多患者很容易在五年内复发。SOX2是一个非常重要的干细胞标志蛋白,它调控着一些在胚胎发育、晶状体发育和神经分化过程中起关键作用的基因,并与维持干细胞特性有密切关系。近些年的研究还发现,SOX2在多种肿瘤中高表达,如肺癌、胰腺癌、乳腺癌、神经胶质瘤、前列腺癌等。在这些癌症中,SOX2可以影响肿瘤的增殖、迁移、耐药等多方面的功能。但是在卵巢癌中的功能研究甚少。本课题主要是针对SOX2在卵巢癌迁移、侵袭以及耐药方面功能进行探讨。目前针对卵巢癌的化疗药物的疗效都不明显,而且毒性较大,无靶向性,因此不能对病人起到良好的治疗效果。对此,我们开展了针对卵巢癌细胞进行靶向性治疗的研究,目标是：通过靶向性,将药物定向地送到卵巢癌细胞中去,这样就可以增加卵巢癌细胞周围的药物浓度,减少在其他器官和血液中的浓度,从而来降低毒性。本文的第一部分,我们发现当通过细胞质粒转染技术使SOX2过表达时,卵巢癌细胞的迁移能力显著增强,同时,细胞侵袭实验也表明SOX2对细胞侵袭能力有促进作用,我们还通过明胶酶谱实验证实了金属蛋白酶MMP-2、MMP-9的活性受到SOX2的调控。为了进一步探讨了SOX2对卵巢癌转移影响的分子机制。我们通过对一些能诱导细胞迁移发生变化的基因进行样本间的定量PCR发现,当SOX2过表达时,一些标志蛋白,如FN1、S100P的表达水平发生了上调。接下来我们也通过免疫印迹方法证实了FN1的表达差异,并通过报告基因系统证实了SOX2对FN1的直接调控关系。最后我们利用siRNA干扰技术证实了FN1对细胞迁移能力变化的影响。本文的第二部分,我们发现当使用shRNA对SOX2进行敲除时,卵巢癌细胞的顺铂耐药性有所下降,同时,对SOX2进行过表达时,耐药性有所增强。此外我们还通过顺铂诱导发现,SOX2随着诱导时间的增加其表达水平也会有所上升。最后我们通过芯片扫描,找到了SOX2调控的一些重要基因来参与细胞耐药的调控。本文的第三部分,我们首先通过MPSS技术和定量蛋白质组学技术找到卵巢癌的靶标蛋白ABHD2、F11R,这两个靶标蛋白不仅能够靶向卵巢癌还能靶向卵巢癌细胞中的耐药细胞,这样能够很好地提高耐药细胞周围的药物浓度,随后我们使用噬菌体展示技术来筛选得到能够靶向ABHD2和F11R的小分子多肽,以期望达到对卵巢癌的靶向治疗。本研究不仅可以提高我们对SOX2在卵巢癌的迁移、耐药作用机制方面的理解,而且还提供了一些潜在的靶标蛋白用以卵巢癌的干预治疗。
【作者】楼小燕；
【导师】林标扬；
【作者基本信息】浙江大学，生物学，2014，博士
【关键词】卵巢癌；SOX2；细胞迁移；侵袭；顺铂耐药；靶标；多肽；

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